编号：

海南省教育厅

高等学校科研项目

申请评审书

研究类别（在相应序号上划O）

①理、工

②农、医

③人文与社会科学

④教学改革研究

学科（专业）门类

生理学

项目名称

罗格列酮对容量超负荷大鼠血流动力学及心肌肥厚的影响

研究类别

基础研究

申请者

许闽广

部门名称

生理学教研室

所在学校

海南医学院（盖章）

申请日期

年04月20日

海南省教育厅制

A表

申

请

者

姓名

许闽广

性别

男

出生年月

.01

职称

讲师

所在部门

生理学教研室

职务

教学秘书

最后学历

本科

最后学位

学士

外语语种及水平

国家职称英语（卫生）等级考试A级

研究方向

心血管生理

申请者参与省级以上社科研究者项目情况及完成情况

项目来源及类别

课题名称

批准时间

是否

完成

国家自然科学基金资助课题（NO.）

MAKP-STAT旁路在心肌肥大反应中的作用（NO.）

年

已完成

海南省教育厅科研基金资助课题（NO.HJKJ）

eNOS基因表达与心肌肥大的相关性研究（NO.HJKJ）

年

已完成

海南省卫生厅科研基金资助课题（NO.琼卫-78）

PKC与NO环路在心肌肥大反应中的作用（NO.琼卫-78）

年

已完成

海南省自然科学基金资助课题（NO.）

一氧化氮在心肌肥大中的作用及其机制（NO.）

年

已完成

申请者本人近三年以来的主要研究成果（注明刊物的年、期或出版社、出版日期）

1.许闽广（第一作者）容量超负荷心肌肥大大鼠血浆肾素-血管紧张素II含量变化海南医学院学报.4.30；12(2)

2.许闽广（第一作者）容量超负荷对大鼠心肌肥大和血压的影响中国热带医学.10.15;5(7):-

3.许闽广（第一作者）电刺激兔小脑顶核对血压和血浆心钠素的影响中国热带医学.12.28;4(6):-

4.许闽广（第三作者）D-核糖对激素诱发大鼠心肌缺血和心律失常保护作用的研究中国热带医学.08.28;4(4):-

5.许闽广（第四作者）一氧化氮和血管紧张素Ⅱ在压力超负荷心肌肥大中的作用海南医学院学报.03.30;8(1):1-4

6.许闽广（第二作者）5-HT1A受体激动剂乌拉地尔对吗啡依赖大鼠戒断反应的抑制作用生理通讯.08.31;17(S1):96-97

7.许闽广（第一作者）乌拉地尔对吗啡戒断大鼠的高血压和心加速有抑制作用中国疼痛医学杂志.12.15;5(4):-

8.许闽广（第二作者）5-HT1A受体激动剂乌拉地尔对吗啡依赖大鼠戒断反应的抑制作用中国药物依赖性杂志.05.28;8(2):-

申请人及所在学位学科点情况

申请人近年来一直从事心血管生理及病理生理机制的研究工作，熟练掌握腹主动－静脉穿刺造瘘诱导容量超负荷心肌肥大模型的制作和有关血流动力学测定、血浆RAS放射免疫测定分析以及心脏质量指数测定。在防治心肌肥大以及抑制心肌细胞肥大反应的信号转导方面既积累了许多实验经验，又有较丰富的相关文献资料，并发表了多篇相关学术论文。

申请人所在的生理学教研室1年生理学获海南医学院首批达标课程，年获海南医学院首批达优课程，年获海南省首批重点建设课程，年获海南省精品课程。该学科承担国家自然科学基金课题1项，省级和厅级课题5项，院级课题3项，有较强的科研基础，有雄厚的科研队伍且科研梯队和结构合理，有一定的科研设备和独立研究室，能胜任本课题研究。

部门负责人（签章）：年月日

2

内页编号：

B表

研

究

课

题

名称

罗格列酮对容量超负荷大鼠血流动力学及心肌肥厚的影响

学科领域

生理学

研究类别

A.基础研究B.应用理论研究C,应用研究(划O)

起止时间

年01月至年12月

成果形式

科研论文

申请

经费

总额

3万元

其它经费来源

自筹

年度用款

年1.6万元

年0.8万元

年0.6万元

一、本课题研究概况及趋势，研究本课题的实际意义和理论意义

心肌肥大是各种因素引起心肌工作超负荷（包括压力超负荷和容量超负荷）的一种适应性反应，但由于心脏形态和功能活动的改变，最后发展为心力衰竭，其预后甚差，目前已被列为心血管疾病的独立危险因子[1]。因此，探讨心肌肥大的发生机制意义重大，成为当今急需解决的研究课题。

心肌肥大反应主要表现为每个心肌细胞蛋白质含量增加，心肌细胞体积增大，但心肌细胞数目没有变化。已经明确压力超负荷及某些生长因子如血管紧张素II（AngII）、a1受体激动剂、内皮素-1（ET-1）及某些细胞因子是导致心肌肥大的重要因子，有资料提示某些扩血管、抑制蛋白质合成的因子可能抑制心肌肥大反应[2]。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisomeproliferator—activatedreceptorγ，PPARγ)是由配体激活的核转录因子，PPAγ与配体结合后，在基因转录水平发挥转录调控作用[3]。有研究证明，人和大鼠心肌存在PPARγ受体[4,5]。噻唑烷二酮类药物(thiazolidionedines，TZDs)，包括曲格列酮、罗格列酮和吡格列酮等，作为胰岛素增敏剂用于II型糖尿病的治疗，近年来被证实是PPAγ选择性配体[6]。已有研究观察发现，PPARγ配体罗格列酮可明显增加正常大鼠和STZ所致糖尿病大鼠离体工作心再灌注时的冠脉流量,显著减轻心肌缺血再灌注损伤并加快心脏功能恢复[7]。王咏等研究证明压力负荷增加引起心肌肥厚,肥厚心肌组织中TNF-α、MPO、PAF含量升高可以被PPARγ人工合成配体罗格列酮钠所抑制[8]。另有研究报道PPARγ配体改善压力超负荷性心肌肥厚，降低动脉血压，但其确切的效应仍不明确[9]。AsakawaM等的研究也发现体外实验和在体实验中过氧化物酶体增殖物活化型受体γ在抑制心肌肥大中起重要作用[10]。本实验室研究资料显示容量超负荷大鼠血浆肾素血管紧张素II水平显著升高，而用血浆肾素血管紧张素II受体阻断剂氯沙坦（losartan）可抑制容量超负荷引起的心肌肥大[11]。本实验室还发现，容量超负荷可引起大鼠心肌肥大,引起肥大的机制可能与心肌细胞对容量超负荷的机械刺激信号产生应答反应,引起心肌细胞跨膜转导信号改变有关[12]。那么，在容量超负荷引起的心肌肥大是否也受PPARγ的影响？其机制如何？有待进一步探讨。

本研究采用容量超负荷性心肌肥厚模型，观察PPARγ配体罗格列酮对容量超负荷大鼠血流动力学和心肌肥厚的影响。这对深入了解PPARγ与心肌肥大之间相互关系以及抑制心肌肥大反应提供新的思路，并对合理防治心肌肥大和寻找临床新药都具有重要的实践意义和理论意义。

参考文献：

1.伍仕敏,叶平，周新等过氧化物酶体增殖物活化型受体γ在抑制大鼠心肌肥厚中的作用.中华心血管病杂志，.03；32（2）：-

2.李小鹰主编.心血管疾病分子生物学.第一版.北京：人民卫生出版社，

3.蔡哲峰，郭宗儒PPARγ调节剂研究进展药学学报，；39（2）：-

4.TakanoH,NagiT,AsakawaM,etal.Peroxisomeproliferators-activatedreceptoractivatorsinhibitlipopolysaccharide-inducedtumornecrosisfactor-expressioninneonatalratcardiacmyocytes.CircRes,,-

5.MehrabiMR,ThalhammerT,HaslmayerP,etal.Theperoxisomeproliferators-activatedreceptorpgamma(PPARgamnma)ishighlyexpressedinhumanheartventricles.BiomedPharmacother.,,56:-

6.张乾勇PPAR的结构与功能及其生物学作用国外医学卫生学分册，；27（5）：-

7.NaitoY,YoshikawaT.Thiazolidinediones:Anewclassofdrugsforthetherapyofischemiareperfusioninjury.DrugsToday(Barc),,40(5):430.

8.王咏，肖颖彬罗格列酮在压力超负荷型大鼠肥厚心肌中抗炎作用的研究，中国急救医学，：26（1）：36-38

9.耿登峰，伍卫，金冬梅等罗格列酮对压力超负荷大鼠血流动力学及心肌肥厚的影响，中山大学学报（医学科学版），；27（1）：47-50

10.AsakawaM,TakanoH,NagaiT,etal.Peroxisomeproliferator-activatedreceptorgammaplaysacriticalroleininhibitionofcardiachypertrophyinvitroandinvivo，Circulation，；：-

11.许闽广，董战玲，翁启芳等.容量超负荷心肌肥大大鼠血浆肾素-血管紧张素II含量变化海南医学院学报.4.30；12(2)

12.许闽广,高凌峰,吉丽敏等.容量超负荷对大鼠心肌肥大和血压的影响.中国热带医学.10.15;5(7):-

3

二、本课题的基本内容，预计突破哪些难题

本课题的基本内容如下：

1.实验分组：

①正常对照组（controlgroup,C）

②假手术组（shamgrop,SHAM）

③容量超负荷(volumoverloadgroup,VOL)

④容量超负荷+生理盐水组（VOL+N.S.）、

⑤容量超负荷+罗格列酮组（VOL+rosiglitazonegroup,VOL+R）、

⑥容量超负荷+氯沙坦组（VOL+losartangroup,VOL+L）

⑦容量超负荷+罗格列酮+氯沙坦组（VOL+rosiglitazone+losartangroup,VOL+R+L）

2.采用容量超负荷大鼠心肌肥大模型（在体实验），观察各组心率（HR）、动脉收缩压（SBP）、动脉舒张压（DBP）、平均动脉压（MAP）、左室舒张末压（LVEDP）、左心室压力上升和下降最大速率（±dp/dtmax）等血流动力学指标的变化。

3.利用电子分析天平测量左心室（包括室间隔）和右心室质量，观察各组的左心室质量指数（左心室质量/体质量，LVW/BW，mg/g）、右心室质量指数（右心室质量/体质量，RVW/BW，mg/g）心肌肥厚指标的变化。

4．利用放射免疫测定分析法进行血浆RAS测定，观察各组血浆肾素活性（plasmarineactivity，PRA）和血浆血管紧张素II（angiotensinII，AngII）水平。

5.利用一步法（Tripure）提取心肌的总RNA，然后用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法分别检测各组左心室肌和右心室肌PPARγmRNA的表达。

预计突破的难题：

1.明确PPARγ配体罗格列酮与容量超负荷心肌肥大之间的关系。

2.初步阐明PPARγ配体罗格列酮参与心肌肥大反应的过程及机制。

三、课题的研究思路和方法，研究工作方案（包括已进行的研究工作情况）和进度计划、中期成果

本实验拟采用容量超负荷大鼠心肌肥大模型，研究PPARγ在容量超负荷心肌肥大反应中的作用及其相关性。拟采用的研究思路和方法，研究工作方案概述如下：

进展计划：

.01-.12完成容量超负荷大鼠模型，以左心室质量/体质比值作为反映心肌肥大指标，探讨明确PPARγ配体罗格列酮与容量超负荷心肌肥大之间的关系。

.01-.12利用放射免疫分析测定技术，检测血浆肾素活性、血浆血管紧张素II水平，分析PPARγ对AngII诱导心肌肥大的影响

.01-.12利用RT-PCR法检测心肌PPARγmRNA的表达，整理实验资料，利用SPSS统计分析实验数据，撰写研究论文。

中期成果：

本课题重点探讨PPARγ配体罗格列酮与容量超负荷心肌肥大之间的关系，为医学基础应用研究。拟以理论性结论在国内核心学术刊物或国际学术刊物上发表科研论文形式提交研究成果，预期可完成2－3篇科研论文。

4

四、研究工作的资料准备情况

课题组成员近年来从事心血管生理及病理机制的研究工作，熟练掌握制作腹主动静脉穿刺造瘘法心肌肥大模型及有关血流动力学测定、血浆RAS放射免疫测定分析、RT-PCR以及心脏质量指数测定等技术。在心肌肥大以及抑制心肌细胞肥大反应的信号转导方面积累了大量的实验数据和国内外文献资料，并发表了多篇相关学术论文。经检索国内年以来、国外年以来文献，见有噻唑烷二酮类药物吡格列酮、罗格列酮等抑制体外诱导的心肌细胞肥大和在体压力超负荷性心肌肥厚的研究报道，但未见有用罗格列酮作用于容量超负荷性心肌肥厚在体实验的文献报道。（附《查新咨询报告书》）

课题负责人于近年来在海南医学院符史干教授指导下，完成了国家自然科学基金资助课题《MAKP-STAT旁路在心肌肥大反应中的作用》的部分研究工作。符史干教授为海南医学院生理学教研室主任，山西医科大学兼职硕士生导师，多年来在预防和逆转心肌肥大方面作了大量的研究工作，曾获得国家自然科学基金和海南省自然科学基金、海南省卫生厅及海南省教育厅研究基金的资助。本课题的部分工作拟在山西医科大学心血管生理研究室（国家重点实验室）完成，所有的仪器设备均能满足本课题研究的需要。

五、详细调研计划（包括调研地点、调研内容、调研对象、调研周期、调研报告的完成时间及报送部门和报送时间）

5

六、究成果的预计去向及使用范围

本课题拟利用血流动力学测量、放射免疫测定分析、RT-PCR等方法，从整体水平和分子水平研究PPARγ配体罗格列酮与容量超负荷心肌肥大的相关性以及PPARγ配体罗格列酮参与心肌肥大的发生过程及机制，为寻找防治心肌肥大的方法提供新的实验和理论依据，为原来作为胰岛素增敏剂治疗II型糖尿病的PPARγ选择性配体罗格列酮用于防治心肌肥大提供药理学实验证明，并为临床相关学科防治心肌肥大提供新的思路。

经费概算单位：万元

类别年度

年

年

年

年

图书资料费

0.1

0

0

调研费

0.1

0

0

文具费

0

0

0

上机费

0.1

0

0

成果打印费

0

0

0.1

小型会议费

0.1

0

0.1

小型仪器设备费

0

0

0

实验材料费

0.4

0.2

0.1

试剂药品费

0.7

0.5

0.2

管理费

0.1

0.1

0.1

合计

1.6

0.8

0.6

需购置的仪器和设备

名称

数量

金额

年度

6

项目组其他成员情况及签名

姓名

职称

年龄

专业

外语语种及程度

分工情况

签名

符史干

教授

47

生理学

国家职称英语（卫生）等级考试A级

全面指导

高凌峰

高级实验师

41

机能学

国家职称英语（卫生）等级考试A级

试剂配制及动物实验

周升

实验师

36

分析化学

国家职称英语（卫生）等级考试A级

放免疫测定

贝宁

助教

26

生理学

国家大学英语四级

实验仪器使用

吉丽敏

实验师

32

病理生理

国家职称英语（卫生）等级考试A级

分子生物实验及动物实验

董战玲

助教

30

生理学

国家职称英语（卫生）等级考试A级

动物实验

翁启芳

讲师

32

生理学

国家职称英语（卫生）等级考试A级

动物实验

华德

主管技师

35

医学检验

国家职称英语（卫生）等级考试A级

放免疫测定及分子生物实验

以上成员近三年来与本课题有关的主要研究成果（注明刊物的年、期或出版社、出版日期）

符史干：

1．蛋白激酶C在血管紧张素II抑制一氧化氮合成中的作用.生理学报，年第4期

2．一氧化氮抑制血管紧张素II诱导心肌肥大反应的机制.中国病理生理杂志

3．新生大鼠心室成纤维细胞条件培养液的促心肌细胞肥大作用.生理学报，；1：34-28

高凌峰：

1.Losatan压抑大鼠压力超负荷高血压和心肌肥大的实验研究.海南大学学报，：19（4）

2.一氧化氮和血管紧张素II在压力超负荷心肌肥大中的作用.海南医学院学报，：8（1）

周升：

1.D-核糖对乌头碱引起小鼠心肺功能紊乱的作用.中华医药卫生，；1（2）：98-

2.D-核糖对激素诱发大鼠心肌缺血和心率失常保护作用的研究.中国热带医学，；4（4）：-，

3.一氧化氮合酶在心血管内皮细胞中表达的调控.中国热带医学，

学校科研管理部门初审意见

负责人（签章）：年月日

7

校学术委员会意见（项目课题的意义、项目组负责人及成员的学术水平、完成该课题的条件等）

该课题研究采用容量超负荷性心肌肥厚模型，观察PPARγ配体罗格列酮对容量超负荷大鼠血流动力学和心肌肥厚的影响。这对深入了解PPARγ与心肌肥大之间相互关系以及抑制心肌肥大反应提供新的思路，并对合理防治心肌肥大和寻找临床新药都具有重要的实践意义和理论意义。该课题负责人具有丰富的科研经验，课题组成员搭配合理，具备完成课题的实验条件，有望完成预期科研目的。

同意申报海南省教育厅科研基金项目。

校学术委员会负责人（签章）：年月日

同行专家评议意见（在相应字母上划0）

课题的意义

A．重要B.一般C.不重要

课题的内容

A.充实B.较充实C.空洞.

课题研究思路和方法

A.清晰、可行B.尚可C.模糊不可行

课题组的研究基础

A.雄厚B.一般C.较差

申请经费

A.合理B.比较合理多/少C.不合理

专家建议：

签名

所在单位

职称

日期

教育厅意见：

年月日

海口龙华天涯易众信息技术工作室